cibles moléculaires pour le traitement des histiocytoses

depuis 2010, plusieurs histiocytoses, auparavant considérées comme une maladie inflammatoire, constituent un néoplasme d'origine myéloïde. en effet, les histiocytoses du groupe l présentent fréquemment des mutations clonales oncogènes activant la voie de signalisation des cellules mapkinase. en outre, certains patients ont été traités avec succès avec des médicaments ciblant cette voie. malgré ces découvertes majeures, l'impact clinique reste faible en dehors des centres experts. en effet, la fréquence des allèles mutants est faible et, à l'exception de la mutation p.v600e de braf, les autres mutations d'histiocytose sont rares dans les tumeurs solides et ne sont donc pas détectées dans les travaux de routine de nombreuses platesformes. de plus, leur activité oncogène et leur sensibilité aux inhibiteurs n’ont pas été testées in vitro. notre objectif est d’étendre l’accès à la médecine personnalisée des patients souffrant de cette maladie rare dans le monde entier. nous prévoyons d’identifier de nouvelles altérations génétiques chez les patients présentant une histiocytose des groupes l, c, r, m ou une histiocytose non classifiée ne présentant pas les mutations les plus fréquentes de braf ou de map2k1. nous utiliserons principalement le séquençage ngs ciblant des mutations de gènes de la voie mapkinase et du contrôle épigénétique de l'hématopoïèse, ou un transcrit de fusion sur des gènes candidats. les cas négatifs avec une infiltration élevée d'histiocytes dans la biopsie subiront également un séquençage complet de l'exome. nous allons également mettre en place une pcr de gouttelettes numériques hautement sensibles permettant la détection des mutations les plus fréquentes malgré une fréquence d'allèle très basse dans les tissus ou le plasma. enfin, nous allons mettre en place des tests in vitro pour évaluer l’efficacité des médicaments ciblant la signalisation cellulaire sur les cellules hébergeant les différentes nouvelles mutations. cette étude aura un impact important sur le diagnostic, le traitement et le suivi des patients présentant une histiocytose avec des mutations peu fréquentes. jusqu'à présent, seuls quelques cas d'histiocytose des groupes c et m et d'histiocytose non classifiée ont été analysés. la présente étude contribuera également à la compréhension de ce groupe de maladies hétérogènes.

since 2010 several histiocytoses, previously considered as inflammatory disease, have been shown to be neoplasm of myeloid origin. indeed histiocytoses of l group frequently have oncogenic clonal mutations activating the mapkinase cell signaling pathway. furthermore some patients have been successfully treated with drugs targeting this pathway. despite these major discoveries, clinical impact is still low outside of expert centers. indeed the frequency of mutant alleles is low, and except p.v600e mutation of braf, the other mutations of histiocytoses are rare in solid tumors, and are therefore not detected in the routine work of many platforms. furthermore, their oncogenic activity and sensitivity to inhibitors have not been tested in vitro. we aim to extend the access to personalized medicine of patients suffering from this rare disease throughout the world. we plan to identify new genetic alterations in patients with histiocytosis of l, c, r, m groups or unclassified histiocytosis lacking the most frequent braf or map2k1 mutations. we will mainly use ngs sequencing targeting either mutations of genes of the mapkinase pathway and of epigenetic control of hematopoiesis either fusion transcript on candidate genes. negative cases with high histiocyte infiltration of biopsy will also undergo whole exome sequencing. we will also set up highly sensitive digital droplet pcr allowing detection of the most frequent mutations despite very low allele frequency in tissues or plasma. finally we will set up in vitro tests to assess efficacy of drugs targeting cell signaling on cells harboring the various new mutations. this study will have high impact on the diagnosis, treatment and follow up of patients with histiocytosis with infrequent mutations. only few cases of histiocytoses of c and m groups and unclassified histiocytoses have been analysed for genetic alterations so far. the present study will also contribute to understanding of this heterogeous group of diseases.